人CD62酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围: 96T
0.6pg/ml-20pg/ml
使用目的:
本试剂盒用于测定人相关样本中 CD62 含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人 CD62 水平。用纯化的人 CD62 抗体包被微孔
试剂盒组成
130 倍浓缩洗涤液
20ml×1 瓶
7终止液
6ml×1 瓶
2酶标试剂
6ml×1 瓶
8标准品(40pg/ml)
0.5ml×1 瓶
3酶标包被板
12 孔×8 条
9标准品稀释液
1.5ml×1 瓶
4样品稀释液
6ml×1 瓶
10说明书
1 份
5显色剂 A 液
6ml×1 瓶
11封板膜
2 张
6显色剂 B 液
6ml×1/瓶
12密封袋
1 个标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1.
20pg/ml
5 号标准品
150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液
10pg/ml
4 号标准品
150μl 的 5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
5pg/ml
3 号标准品
150μl 的 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
2.5pg/ml
2 号标准品
150μl 的 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
1.25pg/ml
1 号标准品
150μl 的 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,
然后再加待测样品 10μl(样品zui终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
6.加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同 3。
8.洗涤:操作同 5。
9.显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
10. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止
操作程序总结:
计算以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值
算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 个月
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