ATP荧光仪在食品行业中的应用（一） 涂抹法测定人员手部细菌总数操作说明

　（“管理值”式测定方式）

　　食品企业都有自己内部的卫生管理程序，企业员工按照规定的洗手程序清洗完毕，每个员工手上残留的细菌差别不会太大，由于微生物检测允许误差范围较大，所以单纯的人员手部检测要建立标准曲线不太现实，建议采取管理值式监控方式：即选取10～20个员工作为代表，让他们严格按照企业规定的标准清洗程序清洗手部，然后按照操作说明逐个涂抹检测，这些员工代表的手部检测的荧光值会形成一个较小的数据区间，将数据从大到小排列，取前5个较大值的平均值作为合格线，即“管理值”。待抽检其他员工时，如果其手部涂抹检测荧光值低于此管理值可视为合格，反之，如果仪器检测值高于此管理值即为不合格，应责令其再去进行手部清洁，因为员工是严格按照企业要求程序清洗手部的，所以以清洗后的荧光值作参考即可。

　　操作说明如下

　　一、设备、耗材及工器具

　　　　SF0012微生物快检仪一台及配套比色杯

　　　　检测配套试剂:ZF0011试剂

　　　　2mL无菌EP管若干

　　　　无菌棉拭子若干

　　　　200μL移液枪两支、200μL无菌枪头及枪头盒

　　　　1000μL移液枪一支、1000μL无菌枪头及枪头盒

　　　　一次性无粉无菌手套

　　　　无菌水（可用未开口的纯净水代替）

　　二、操作准备

　　1.首先将仪器开机初始化并预热10分钟

2.将冷冻备用的检测配套试剂溶化***温。

　　三、样品检验

1. 前处理

　　选取10～20个员工作为代表，让他们严格按照企业规定的标准清洗程序清洗手部。取一个2mL的无菌EP管，用1000μL移液枪移取1000μL无菌水至EP管中，取一无菌棉拭子在EP管中润湿，用棉拭子均匀擦拭待测员工手部，然后将棉拭子放在EP管中不断搅动充分清洗，取出棉签并在EP管壁上尽量挤尽棉签上液体，盖好管盖备用。

涂抹

洗脱

检测

　２．样品检测

　　用移液枪吸取10μL检测配套试剂ZF0011注入比色杯，再用另一只移液枪吸取50μL样品注入比色杯并反复吸吹5次（均质），将比色杯推入测定，得到荧光值Y（RLU）。测定20个员工手部，依次得到Y1、Y2…Y19、Y20。

　　四、数据处理

　　将所测数据按照从大到小顺序排列，取前5个值得平均值作为管理值。

1. 注意事项
2. 选取的员工代表一定要严格按照企业要求的程序清洗手部。
3. 每个员工手部涂抹的面积大小要尽量一致。
4. 整个检测过程中检测人员要全程佩戴一次性无粉无菌手套。
5. 吸取检测配套试剂ZF0011的移液枪及枪头*好单用，以免发生交叉污染。