利用混合基质色谱柱分析盐酸胍含量

盐酸胍,分子式CH5N3·HCl,是一种强效离液剂,不仅可以作用蛋白的变性及其后续复性,还能促进疏水性分子溶解性。性质易溶于水和乙醇,水溶液呈中性,可以用作医药、农药、染料及其它有机合成物的中间体,是制造磺胺类药物及叶酸等药物的重要原料。

但由于无紫外吸收和易电离的特点,盐酸胍在反相液相色谱上分离检测较为困难。微源实验室利用文献资料和自有设备利用混合基质色谱柱和CAD对盐酸胍进行了分离检测实验,按照以下设置色谱条件进行测定,

色谱柱

DionexTrinityP1,3.0*100mm,3μm

柱温

30°C

流动相(A:B=30:70)

A:乙腈,B:0.02M醋酸铵溶液,pH=5

流速

1mL/min

进样体积

0.8μL

检测器

CoronaCADUltra(电雾式检测器)

雾化温度

25℃

精确量取盐酸胍25mg,去离子水定容,调配成浓度为5mg/mL标准储备溶液后分别稀释配置为0.05、0.25、0.5、1.0、2.0mg/mL梯度浓度的标准工作溶液,待色谱分析。样品经高速离心后,取上清液过滤,放置预备进样。最终谱图如下:

对样品采用外标法定量处理后进样测定,得出结果为0.49mg/mL。加标回收实验,回收率结果为大于99.5%。

该方法相对操作简单,经过实验操作验证稳定好、灵敏度高,选择性强,可以适用药物生产过程中盐酸胍含量的检测,加标回收率符合要求。

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