文章中的疏漏：

写作中可学习、修改和供他人借鉴的内容：

收集唾液前2 h禁食，前30 min使用清水漱口，每次采集唾液时间最好为早上8:00-9:00，采集量为5-10 mL，采集完成后在4 ℃下12 000 r/min离心15 min，在超净台中用无菌枪头取上清，并转移至5 mL注射器中，接口接入0.22 μm滤器，过滤至无菌15 mL离心管中，再分装至1.5 mL EP管内，-80 ℃冰箱保存。

文章中的疏漏：

鹿角材料因其与羟基磷灰石高度相似的结构和可再生的特点，在骨修复中有促进成骨和成血管的作用。而如何降低鹿角材料植入体内引起的异物反应？在该研究中选择诱导M1细胞的间接方法来证明去抗原马鹿角松质骨的免疫原性较佳，选择该方法的理由？

写作中可学习、修改和供他人借鉴的内容：

（1）目前对于材料免疫原性检测的方法有：①将药物或材料浸提液注入动物腹腔的急性免疫实验；②材料植入动物体内后相关免疫指标的检测；③对植入材料周围组织的染色分析；④以吞噬细胞、单核细胞、巨噬细胞作为对象的实验。

（2）文章中选择诱导M1型巨噬细胞的间接方法来证明的理由，一是巨噬细胞在免疫中的作用受到人们的关注并进行相应的研究；二是植入材料在体内引起的异物反应主要是巨噬细胞大量向M1型细胞转化。因此，在体外将细胞诱导为M1型细胞后进行实验。

文章中的疏漏：

写作中可学习、修改和供他人借鉴的内容：

采纳了审稿专家的意见，补充实验用Transwell小室进行细胞共培养，分为以下4 组：①脂肪干细胞组；②脂肪干细胞+血管内皮细胞共培养组(细胞比例1∶1)；③脂肪干细胞+成纤维细胞共培养组(细胞比例1∶1)；④脂肪干细胞+血管内皮细胞+ 成纤维细胞共培养组(细胞比例1∶1∶1)。将脂肪干细胞以每孔5×104 的细胞密度接种于20 块6孔板的Transwell 小室中，血管内皮细胞和成纤维细胞按分组接种于6 孔板中，通过孔径为0.4 μm 的Transwell小室建立非接触共培养模型，放入37 ℃、体积分数为5%CO2培养箱中培养，待细胞生长至一定数量时将血清体积分数降至2% 维持培养，共培养2 周时显微镜下观察记录。

文章中的疏漏：

写作中可学习、修改和供他人借鉴的内容：

（1）已提供人胃癌SGC-7901细胞株的STR鉴定 告。

（2）检测方法：用Axygen 的基因组抽提试剂盒提取DNA，采用21-STR扩增方案扩增，在ABI 3730XL 型遗传分析仪上对STR 位点和性别基因Amelogenin 进行检测，结果显示各细胞分型结果良好，在该细胞系中发现多等位基因。

文章中的疏漏：

文章叙述的重点是“脂多糖预处理活化的星形胶质细胞胞外囊泡对神经元的保护作用”，神经元是研究的主要对象，但文章大篇幅阐述的是星形胶质细胞胞外囊泡及脂多糖预处理的星形胶质细胞胞外囊泡对PC12细胞的影响，二者对神经元影响的内容较少，为什么不直接应用神经元进行相关实验？

写作中可学习、修改和供他人借鉴的内容：

（1）由于原代神经元属于终末细胞，提取后无法进行体外增殖传代，不利于相关试验的大量开展及机制探寻，故国内外利用PC12细胞，HT22细胞，N2a细胞等替代细胞制作相关损伤模型以研究神经损伤保护等机制。

（2）该实验先利用PC12细胞进行机制摸索，再在原代神经元上进行重复验证，以探求星形胶质细胞胞外囊泡及脂多糖预处理的星形胶质细胞胞外囊泡是否能够抑制神经细胞凋亡，起到神经保护作用。

文章中的疏漏：

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（1）F4/80是巨噬细胞比较高度特异的表面marker，一般可将F4/80阳性细胞认定为巨噬细胞，在巨噬细胞相关实验中被广泛用来作为巨噬细胞表型鉴定，例如：

Anzai A, Anzai T, Nagai S, et al. Regulatory role of dendritic cells in postinfarction healing and left ventricular remodeling[J]. Circulation, 2012, 125(10):1234-45.

（2）而以F4/80鉴定出巨噬细胞后需要进一步确定其亚型，而高表达CD11b的亚型被认为是M1：

Shortman K , Liu Y J . Mouse and human dendritic cell subtypes[J]. Nat.rev.immunol, 2002, 2(3):151-161.

Hirata Y , Tabata M , Kurobe H , et al. Coronary Atherosclerosis Is Associated With Macrophage Polarization in Epicardial Adipose Tissue[J]. journal of the american college of cardiology, 2011, 58(3):248-255.

文章中的疏漏：

写作中可学习、修改和供他人借鉴的内容：

①在内径适宜(约2 mm)的节节草茎杆节间段截取1 cm长的导管，于去离子水中浸泡24 h；②将导管置圆底烧瓶中以300 mL 10%硫酸在60℃水浴条件下反应40 min取出，用双蒸水清洗至中性；③将导管置300 mL 10%氢氧化钠中，在60℃水浴条件下反应20 min取出，用双蒸水清洗至中性；④将导管依次浸泡于10 mL 0.5%胰酶与10 mL 1%木瓜蛋白酶中，在37 ℃条件下消化10 min；⑤用体积分数为30%，50%，70%，90%，100%梯度乙醇对导管脱水，每个梯度10 min，使导管变成半透明管状；⑥最后导管置于冰箱4 ℃保存，用于后续的表面修饰。

文章中的疏漏：

脂肪间充质干细胞的体外培养方法主要包括组织块法和酶消化法。但酶消化法因酶的种类、活性不同而消化时间长短不一，所获得的细胞相对较少，因而不能保证实验成功率。文章介绍了原代大鼠脂肪间充质干细胞培养方法中对消化酶的选择，为什么选择0.1%Ⅱ型胶原酶？其与胰蛋白酶、Ⅰ型胶原酶比较的优势在哪？

写作中可学习、修改和供他人借鉴的内容：

（1）课题组经过反复探索和实验总结认为：由于脂肪组织中含有大量胶原纤维，因而可采用胶原酶进行分离细胞，如果使用胰蛋白酶消化，则获得的细胞数量较少。

（2）Ⅱ型胶原酶与Ⅰ型胶原酶无明显差别。选择0.1%Ⅱ型胶原酶是由于其含有更高的蛋白酶活性，可有效缩短消化时间，提高实验效率。

（3）将大鼠脂肪组织剪碎成糊状后，使用0.1%Ⅱ型胶原酶在37 ℃培养箱中消化45 min为最佳；期间每隔15 min振荡摇晃培养瓶1次，不仅可以增加组织和胶原酶的接触面积，还能缩短消化时间，从而减少消化酶作用时间过长对脂肪间充质干细胞活性造成损伤，进而提高了细胞获得率，简单高效地分离培养出了大鼠脂肪间充质干细胞。