题释义:
尿液环境:是连接肾与膀胱通道中的细胞在一种主要成分为水、尿素、尿酸、无机盐的液体生存空间中,直接或间接影响细胞生存的各种因素。此次研究选择pH 5.5、高浓度渗透压为2 000 mOsm/(kg?H2O)的人工尿液和一定比例的培养基稀释构成细胞液体生存空间的影响因素。
肠上皮细胞:是具有极性的柱状上皮细胞,参与小肠黏膜上皮组织的构成,由隐窝下1/3处的干细胞生成,在3-5 d内到达肠腔,其子代细胞沿隐窝绒毛细胞轴迁移、逐渐成熟衰老最终在绒毛顶端脱落。肠道黏膜上皮细胞稳态是由上皮细胞不断增殖与凋亡之间的平衡来维系,一般情况下凋亡处于低水平。
背景:回肠代输尿管重建尿路,在临床上取得了较好的疗效。回肠代输尿管后的适应性改变与什么有关目前尚未见有关 道。此次研究希望通过观察尿液对肠上皮细胞内凋亡因子表达的影响,进一步探讨背后可能的机制,为回肠代输尿管后的病理学特点提供实验依据。
目的:观察尿液环境对肠上皮细胞内凋亡因子半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、Bax、Bcl-2表达的影响,进一步探讨尿液环境是否促进了肠上皮细胞的凋亡及其机制。
方法:选取人工尿液分别与培养基按0,1∶1,1∶2,1∶4,1∶8,1∶16,1∶32,1∶64,1∶128进行稀释,处理人正常肠上皮细胞,分别处理24,48,72 h,用CCK-8法检测,观察尿液对肠上皮细胞增殖的影响。采用RT-PCR法和Western blot法检测肠上皮细胞中Caspase-3、Bax和Bcl-2的mRNA和蛋白表达情况。
结果与结论:①肠上皮细胞内凋亡因子Caspase-3、Bax在尿液浓度最高的组中呈高表达,随着尿液浓度梯度的不断降低,表达水平逐渐降低;②肠上皮细胞内抗凋亡因子Bcl-2在尿液浓度高的组中(1∶8和1∶16组)呈低表达,随着尿液浓度梯度的不断降低,表达水平逐渐升高;③提示尿液浓度越高,促凋亡因子Caspase-3、Bax在肠上皮细胞内呈高表达,而抑制凋亡因子Bcl-2呈低表达,表明尿液对肠道上皮细胞具有凋亡促进作用。
https://orcid.org/0000-0002-4345-8869 (徐彬)
中国组织工程研究杂志出版内容重点:组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程
关键词: 尿液, 肠上皮细胞, 凋亡, 回肠, 输尿管, Caspase-3, Bax, Bcl-2
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