由于具有无损、高特异性等特点，光学荧光显微镜一直是生物实验室进行研究的必备之选。相较于二维成像，三维超分辨显微成像技术在生物研究中具有显著的优势。由于光学衍射效应（Diffraction Effect），经典的单镜头显微镜系统在轴向（厚度方向）的分辨率表现不佳——即使是新兴的超分辨显微成像技术也概莫能外。为了追求三维一致的分辨能力，研究人员开发了基于对置双镜头的4Pi显微镜架构，并进而开发了对应的超分辨版本。然而，由于鬼影效应（Ghost Image）和样品像差累积效应，厚样品成像一直是4Pi超分辨显微成像技术的“禁地”。
图 2 对于HeLa细胞中高尔基体（Golgi Apparatus）和囊泡（COPI Vesicle）的成像结果。其中，绿色和洋红色分别为经过免疫荧光标记的GM130和βCOP蛋白。图a和b展示了同一成像区域的两个侧向切面。
图 3 单个果蝇卵环沟的成像结果。图中，绿色和洋红色分别为经过免疫荧光标记的HtsRC和F-actin蛋白。
系统控制开源代码：
https://github.com/bewersdorflab/isoSTED
原文链接：
https://doi.org/10.1038/s41592-021-01149-9
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