凝胶色谱(GPC)测试常见问题

Q1:样品基质中有大量高分子脂类, SPE小柱分离效果不佳,没有类似SPE小柱那样的凝胶色谱小柱,可以起到分离大分子物质的效果?

A:理论上液相接上凝胶色谱柱不接检测器可以达到净化效果,把收集到的溶液再浓缩定容即可。目前市面上有一类多功能净化住内含有多重吸附基质,可快速、选择性地吸附样品中的脂类、蛋白质、色素等杂质,且不吸附待测组分,达到快速净化的目的。

Q2:GPC系统如何平衡??

A:1)安装色谱柱之前,用两通管连接管路,用流动相替换系统后换上GPC柱子;(注意溶剂互溶情况)

2)RID平衡操作

分析开始前,用流动相冲洗检测器流路。流动相流速1ml/min,切换到RFlow,使流动相通过检测池的样品池和参比池,冲洗20min左右。然后切换RFlow 流路数次,将气泡赶出检测池。关闭RFlow,等待基线平稳。当Balance值高于50,进行Balance调整;

3)色谱柱平衡

等溶剂峰出峰后在经过约一次分析时间后基线才能走平。

Q3:GPC仪器对载体的要求?

A:1)良好的化学稳定性和热稳定性;

2)有一定的机械强度;

3)不易变形;

4)流动阻力小;

5)对试样没有吸附作用;

6)分离范围越大越好(取决于孔径分布)等;

7)载体的粒度愈小,愈均匀,堆积的愈紧密,色谱柱分离效率愈高。

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