寻找活性成分一直是天然产物化学研究的主流,研究方法大都采用了经典的植物化学提取分离方法与现代技术相结合,既运用了传统的溶剂提取、柱层析分离的方法,又运用了正反相分离(如硅胶、HP20、RP-18、MCI、Sephdex LH-20)、HPLC制备等现代技术手段分离纯化次生代谢产物,利用光谱分析手段,包括UV、IR、NMR、MS、X-Ray对化合物进行结构鉴定。对于提取分离方法,由于柱层析方法的简单高效备受研究人员的亲睐。
在天然活性成分研究中,发现越来越多的水溶性高分子化合物具有较强的生理活性,进而使用常见的硅胶、氧化铝、聚酰胺等吸附剂对目标样品进行分离。 在20 世纪 60 年开始使用一批新型吸附剂, 如大孔吸附树脂、葡聚糖凝胶等,发现它们对水溶性成分有独特的分离效果。所以在天然产物的研究中,硅胶基质的填料(正相硅胶,反相RP-C18),大孔吸附树脂的填料(Diaion HP20、Diaion SP207、MCI GEL CHP20/P120)和葡聚糖凝胶类填料(Sephadex LH-20)应用十分广泛。
同时提取分离方面的层析填料常规参数如下:
填料名称 | 基体 | 粒径分布(um) | 平均粒径(um) | 比表面积(m2/g) | 细孔容积(ml/g) | *频度半径(A) |
DIAION HP20 | 苯乙烯二乙烯基苯 | 250 | 250 | 590 | 1.3 | 290 |
MCI GEL CHP20/P120 | 苯乙烯 | 75-150um | 120 | 520 | 1.17 | 30 |
RP-C18 ODS | 硅胶 | 45-55 | 50 | 310 | 1.1 | 120 |
Sephadex LH-20 | 葡聚糖凝胶 | 18-111 | 70 |
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