十招致敌!不再烦恼移液污染

Overview
在移液操作中,要获得可靠的结果,防止污染***重要。需要辨识出潜在的污染机制,以便制定针对性的解决方案。

 

 

文末,还有10个避免移液污染的小贴士,为你的移液工作排除忧患。

 

 

1. 移液器对样本的污染

当受污染的移液器或移液器吸头污染样本时,就会造成这种类型的污染。

大多数制造商生产的移液器吸头有多种纯度级别。纯度可分为三个级别:

– 无纯度证明
– 有证明不含 DNA 酶、RNA 酶和内毒素等污染物
– 经过灭菌,不含微生物

DNA酶、RNA酶和内毒素等污染物难以通过任何灭菌法去除,因此,在制造期间防止污染非常重要。需要单独检测是否含有这些污染物,通常由第三方实验室进行。制造后灭菌可确保吸头在交付给客户时不含任何微生物(细菌、virus等)。

在日常的实验室工作中,通过以下这些简单的准则可避免移液器***本的污染:

– 针对应用选择相关纯度级别的吸头。
– 使用(预灭菌的)滤芯吸头或正压置换式吸头。
– 对于某些制造商生产的移液器,可使用安全圆锥过滤器。过滤器可防止气溶胶进入移液器内部并污染后续的样本。
– 在每个样本操作后,务必更换移液器吸头。
– 定期对可能接触样本的移液器或组件进行高压灭菌或消毒。
 

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2. 样本对移液器的污染
当被转移的液体或来自被转移液体的气溶胶颗粒进入移液器内部时,即发生这种类型的污染。为将样本对移液器的污染风险降低,建议采取以下预防措施:

– 松开移液器按钮时务必要缓慢,以防止移液器吸头内有气溶胶形成和不受控的液体飞溅。
– 在移液期间保持移液器垂直,并将移液器垂直存放。这能防止液体流进移液器内部。
– 使用滤芯吸头或正压置换式吸头,以防止气溶胶从样本进入移液器内部。或者,可以在移液器吸头上使用安全圆锥过滤器。

 

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3. 样本对样本的污染
当来自某个样本的气溶胶或液体残留被带到下一样本时,即发生样本对样本的污染(也叫残留污染)。例如,当同一移液器吸头被多次使用时,即发生这种污染。为避免残留污染:

 

– 使用滤芯吸头或正压置换式吸头,以防止气溶胶从样本进入移液器内部,再进入下一样本。或者,可以移液器洗头上使用安全圆锥过滤器。
– 在每个样本操作后,务必更换移液器吸头。
– 如果怀疑移液器受到污染,请按制造商的说明对移液器进行高压灭菌或消毒。

 

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定义
 

去污
任何通过降低微生物负荷以防止污染的活动。包括各种灭菌、消毒和杀菌方法。

 

灭菌
灭活所有微生物,包括细菌内生孢子。可通过使用蒸汽、加热、化学品或辐射来实现。
 

高压灭菌
对实验室来说,高压灭菌(湿热)是一种有效的灭菌法。例如:使用高温高压的饱和蒸汽来灭活微生物,以及对实验室塑料和玻璃器皿等的去污处理。曝露时间和温度***重要。此外,蒸汽需要穿透整个微生物负荷方可有效地净化。
 

消毒
清除几乎所有病原性微生物(不包括细菌内生孢子)并将微生物污染降低***接受的水平。这是一种用于表面净化的实用方法。应根据设想的污染类型选择消毒剂(如:醇类、酚类化合物、卤素)、浓度和曝露时间。
 

杀菌
对活组织应用抗微生物化学品以消除微生物。

 

DNA酶
一类强大的酶(核酸酶),可通过将 DNA 水解成短片段来降解它。在 DNA 纯化期间,即使是痕量的 DNA 酶,也可导致 PCR 等DNA技术产物产率低、无产物或产物降解。污染源:与人接触、唾液、细菌。

 

RNA酶
一类强大的酶(核酸酶),可催化 RNA 降 解成短的片段。这类酶非常稳定,难以去除。污染源:皮肤油脂、毛发、眼泪、细菌。

 

内毒素
脂多糖(一种大分子)是大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏杆菌、假单胞菌和嗜血杆菌等革兰氏阴性菌外膜的组成部分。可造成人发烧并损害细胞培养物的生长。当细菌死亡和细胞壁被破坏时,它会被释放到环境中。污染源:内毒素存在于细菌能生长的任何地方,如:空气,水,土壤,皮肤,原材料,任何非无菌环境等。

 

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